Millipore密理博3KD超滤离心管

Millipore密理博3KD超滤离心管 UFC900396

使用注意事项

（1）选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。
（2）新买来的超滤是干燥的，使用前加入超纯水，水量*过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。
（3）平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。不同离心机的转速 rpm换算成g之后，有所不同。离心机的加速度调至zui低档，减小对膜的压力。注意，一定要等离心机达到目的转速之后，方可离开离心机，否则离心机出问题时，无法*时间处理。膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。
（4）当浓缩到剩下1ml时，取50ul缓冲溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mgml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的缓冲溶液，直到蛋白不发生沉淀为止。
（5）前面几步用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候，轻轻加入新的Buffer（经0.22um超滤膜超滤），再 浓缩至1ml左右，连续三次，zui后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定，一般不多于500ul，也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算，三次达到1000倍以上，基本上可以达到换buffer的目的。

 应用
●●浓缩含有抗原、抗体、酶、核酸（单株或双株DNA/RNA样本）、微生物、洗出液和净化样本
的生物样本
●●净化组织培养基提取液和细胞溶解液中的大分子成分，从反应混合液中去除引物、连接或
分子标记，在HPLC之前去除蛋白质
●●除盐、更换缓冲液或渗滤

所提供的材料
Amicon? Ultra-4装置包括一个盖子、一个过滤器和一个离心管。

所需设备
●●带有摆桶式或定角式转子的离心器以及可以容纳17 mm × 124 mm 15 mL锥底试管的
样本腔/试管座
注意： 为了避免在离心过程中损坏装置，在旋转前请检查间隙。
●●带有200微升（μL）*的移液管，用于浓缩液回收

适用性
为确保对预定用途的适用性，建议进行初步的回收和截留试验。 请参见“如何量化回收”
部分。

装置储存与保质期
储存在15–30 °C下。保质期自生产之日起3年。密理博3KD超滤管UFC900396

1、Amicon Ultra系列离心超滤管，可用于生物样品纯化、蛋白质浓缩、脱盐和缓冲液更换，垂直结构的膜减少了浓差极化，快速离心并可直接吸取回收样本，浓缩倍数高达80-100 倍，是样本处理的得力助手。
超滤管分为0.5ml、4ml、15ml三种上样体积，并有3kd、10kd、30kd、50kd、100kd五种截留分子量。
2、产品订购信息：
Amicon Ultra-0.5系列（货号：UFC500396、UFC501096、UFC503096、UFC505096、UFC510096）
Amicon Ultra-4系列（货号：UFC800396、UFC801096、UFC803096、UFC805096、UFC810096）
Amicon Ultra-15系列（货号：UFC900396、UFC901096、UFC903096、UFC905096、UFC910096）

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