小编告诉你超滤离心管使用需注意这些
更新时间:2021-03-04 点击次数:1136次
超滤离心管的膜材质是聚醚砜膜,截留分子量明确而准,物化性能稳定,蛋白吸附极低,产品回收率高。可以对病毒进行多倍甚至高倍浓缩,有专门针对病毒的膜,不同的病毒需要选择合适的膜孔径。超滤离心管在使用前应用纯化水进行初离心,以验证其完整性,每次使用完成后,要求湿态保存,防止膜干燥。
超滤离心管使用注意:
1、选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。
2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入超纯水,水量*过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。
3、直接损坏超滤膜。要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法一时间处理。膜与转轴的方向根据说明书调整。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时,取50ul缓冲溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适。