超滤离心管选择的过程中需要注意哪些问题
更新时间:2022-05-17 点击次数:1075次
超滤离心管在进行超滤和离心时的注意事项:
在操作过程中需避免长时间或高速离心。我们的产品虽然已采用防死角设计,但也要注意避免过度离心造成的膜表面干燥从而造成不可逆吸附,并且要避免过度浓缩。最终体积越小,越容易因表面吸附而损失得率。离心后,可轻轻吹吸过滤膜截留的溶液数次,必要时补加入一定体积的缓冲液冲洗膜表面,有利于减少膜表面的吸附,提高回收率,尽量避免 TIPS 接触膜表面。
超滤离心管选择的过程中需要注意哪些问题:
1、选择合适的截留分子量,通常是靶标1/3大小的截留分子量适合。但有时则需要更小的孔径来满足回收率的要求。如果在病毒和核酸样品,可参看下面截留分子量和病毒颗粒分子大小以及核酸大小的换算表。
2、考虑样品和分子特性:比如改变pH 可能增加构象改变的风险,而降低温度可能降低浓缩效率等。
3、使用合适的装置处理方法:例如预冲洗以去除分析物或用非干扰蛋白冲洗以钝化结合位点并减少损失。
4、选择合适的装置:赛多利斯拥有适用于低浓度样品、DNA、蛋白质、病毒、过滤应用等广泛的装置选项;选择合适的装置可以有效改善结果。
5、选择正确的膜:超滤没有太多的膜选项,但您应对再生纤维素(RC)、聚醚砜(PES)材料进行测试,以确定哪种材料可为您的特定材料提供低的非特异性结合和*的回收率。
6、考虑样品控制方法,例如使用装置内的“死体积”移走所有截留物,或预灌装滤液管以控制截留物的最终体积。